Detecção de flavivirus e alphavirus em mosquitos (diptera: culicidae) capturados em região próxima à Três Lagoas ­ Ms / Detection of flavivirus and alphavirus in mosquitoes (diptera: culicidae) captured in a region close to Tres Lagoas ­ Ms / Detección de flavivirus y alphavirus en mosquitos (diptera: culicidae) capturados en una región cercana a Tres Lagoas ­ Ms

Introdução: Arbovírus são causadores de doenças humanas, sendo que mudança ecológicas e aumento do contato humano-vetor aumenta a possibilidade de surtos. Objetivo: Detectar, identificar e caracterizar arbovírus presentes em mosquitos vetores capturados em regiões de mata próximas a Três Lagoas, MS. Metodologia: Mosquitos foram capturados utilizando armadilhas de luz em regiões de mata circunvizinha a Três Lagoas. Os mosquitos capturados foram classificados por gênero (chave morfológica) e agrupados em pools com até 20 espécimes, e utilizados através da reação de RT-PCR com posterior sequenciamento e análise filogenética. Resultados: Foram capturados 851 dos gêneros: Culex spp. (11 pools); Aedes spp. (13 pools); Haemagogus spp. (7 pools) e outros gêneros não identificados. Sequencias de vírus Dengue (DENV) foram amplificadas de 2/13 (15,38%) pools de Aedes spp. e uma sequência de vírus Mayaro (MAYV) 1/7 (7,7%) foi amplificada de pools de Haemagogus spp. As análises filogenéticas mostraram que as sequências de DENV agrupava-se no clado de DENV1 e DENV2. A sequência de MAYV agrupou-se junto a sequências de amostras de infecções humana por MAYV do grupo L. Conclusão: Estes resultados reforçam a circulação de DENV, que é causador de surtos anuais de doenças febris agudas no município, e detecção, por primeira vez na região, a circulação de MAYV, reforçando a necessidade de monitoramento viral constante nessa região.

Introduction: Arboviruses cause human diseases, and ecological changes and increased human-vector contact increase the possibility of outbreaks. Objective: To detect, identify and characterize arboviruses present in mosquito vectors captured in forest regions close to Tres Lagoas, MS. Methodology: Mosquitoes were captured using light traps in forest regions surrounding Tres Lagoas. The captured mosquitoes were classified by gender (morphological key) and grouped into pools with up to 20 specimens and used through the RT-PCR reaction with subsequent sequencing and phylogenetic analysis. Results: 851 of the genera were captured: Culex spp. (11 pools); Aedes spp. (13 pools); Haemagogus spp. (7 pools) and other unidentified genera. Dengue virus (DENV) sequences were amplified from 2/13 (15.38%) pools of Aedes spp. and a Mayaro virus (MAYV) sequence 1/7 (7.7%) were amplified from pools of Haemagogus spp. Phylogenetic analyzes showed that one of the DENV sequences clustered in the DENV1 and DENV2 clade. The MAYV sequence was grouped together with sequences from samples of human MAYV infections of the L group. Conclusion: These results reinforce the circulation of DENV, which causes annual outbreaks of acute febrile illnesses in the municipality, and detection, for the first time in the region, the circulation of MAYV, reinforcing the need for constant viral monitoring in this region.

Introducción: Los arbovirus causan enfermedades humanas, y los cambios ecológicos y el mayor contacto humano-vector aumentan la posibilidad de brotes. Objetivo: Detectar, identificar y caracterizar arbovirus presentes en mosquitos vectores capturados en regiones de selva próximas a Tres Lagoas, MS. Metodología: Los mosquitos fueron capturados utilizando trampas de luz en las regiones forestales que rodean Tres Lagoas. Los mosquitos capturados fueron clasificados por género (clave morfológica) y agrupados en pools de hasta 20 ejemplares, y utilizados mediante la reacción RT-PCR con posterior secuenciación y análisis filogenético. Resultados: Se capturaron 851 de los géneros: Culex spp. (11 pools); Aedes spp. (13 pools); Haemagogus spp. (7 pools) y otros géneros no identificados. Las secuencias del virus del dengue (DENV) se amplificaron a partir de 2/13 (15,38 %) grupos de Aedes spp. y una secuencia de virus Mayaro (MAYV) 1/7 (7,7%) de pools de Haemagogus spp. Los análisis filogenéticos mostraron que una de las secuencias de DENV se agrupaba en el clado DENV1 y DENV2. La secuencia de MAYV se agrupó con secuencias de muestras de infecciones humanas de MAYV del grupo L. Conclusión: Estos resultados refuerzan la circulación de DENV, causante de brotes anuales de enfermedades febriles agudas en el municipio, y la detección, por primera vez en la región, la circulación de MAYV, reforzando la necesidad de un monitoreo viral constante en esta región.

Biologia, ecologia e taxonomia molecular de Mansonia (Mansonia) Blanchard, 1901 (Diptera: Culicidae) / Biology, ecology and molecular taxonomy of Mansonia (Mansonia) Blanchard, 1901 (Diptera: Culicidae)

Introdução - As fêmeas do gênero Mansonia Blanchard, 1901 depositam seus ovos na face inferior das folhas de plantas aquáticas presentes em coleções de água doce. Após a eclosão, as larvas e, depois, as pupas se mantêm fixadas aos tecidos submersos das plantas. Assim que emergem, as fêmeas adultas hematófagas buscam, voraz e agressivamente, vertebrados que possam lhes servir como fontes de repasto sanguíneo. Esse comportamento pode prejudicar severamente a Saúde Pública e a economia em áreas com altas densidades populacionais de Mansonia spp. Para além do incômodo causado pelas picadas, algumas espécies transmitem patógenos aos humanos em certas regiões geográficas. Para que sejam eficazes, as medidas de monitoramento e controle das populações de Mansonia spp. devem ser planejadas com base na biologia de cada espécie e seus padrões de interação com fatores bióticos e abióticos nos ecossistemas. Dessa forma, a identificação acurada dos exemplares coletados em pesquisas de campo é fundamental, mas é dificultada pelos padrões de heteromorfismo intraespecífico e isomorfismo interespecífico historicamente observados. Objetivo - Adquirir conhecimentos inéditos para o planejamento de ações de monitoramento e controle populacional de Mansonia (Mansonia) spp. Métodos - Realizaram-se: ampla revisão bibliográfica narrativa; coletas de espécimes imaturos e adultos em três regiões do Brasil; identificação morfológica das amostras em nível específico; sequenciamento da região código de barras do gene mitocondrial codificador da subunidade I da enzima oxidase do citocromo c (COI); e análise das sequências por meio de cinco métodos diferentes, baseados em distâncias genéticas estimadas com o modelo Kimura dois-parâmetros (Neighbor joining, ABGD, ASAP e RESL) e em inferência filogenética de máxima verossimilhança (mPTP). Resultados - Os conteúdos bibliográficos examinados foram enfeixados em um único manuscrito que apresenta, em síntese, dados de Mansonia spp. sobre desenvolvimento, interações com hospedeiros, padrões alimentares, importância epidemiológica e adaptabilidade a ambientes antropogênicos, entre outros. A análise das amostras de imaturos do lago da Usina Hidrelétrica Santo Antônio revela evidências de alternância na associação com as diferentes espécies de macrófitas do local e o registro inédito de larvas de Mansonia humeralis associadas às raízes de Limnobium laevigatum. Trezentas e vinte e sete novas sequências da região código de barras do gene COI foram geradas a partir de exemplares de Mansonia (Mansonia) spp. A identificação baseada na morfologia apontou oito espécies na amostra de culicídeos. Os resultados dos cinco métodos implementados para a segregação das sequências em unidades taxonômicas operacionais (UTOs) foram majoritariamente congruentes. Os padrões de polimorfismo das sequências permitiram distinguir as oito espécies, corroborando a prévia identificação morfológica. No entanto, há evidências de que ao menos três dos táxons morfologicamente definidos podem representar complexos de espécies taxonomicamente desconhecidas. Foram obtidos os primeiros registros da região código de barras do gene COI para Mansonia fonsecai, Mansonia iguassuensis e Mansonia pseudotitillans. Conclusões - A reunião de informações referenciadas no manuscrito resultante da revisão bibliográfica facilitará a consulta para pesquisas futuras. A publicação dos dados inéditos sobre taxonomia molecular e associação com macrófitas aquáticas beneficiará o planejamento para o monitoramento e controle populacional de Mansonia spp.

Introduction - Females of the genus Mansonia Blanchard, 1901 lay their eggs on the underside of aquatic plant leaves in freshwater collections. After hatching, the larvae and later the pupae remain attached to the submerged plant tissues. As soon as they emerge, the hematophagous adult females search, voraciously and aggressively, for vertebrate sources of blood meal. In areas with high population densities of Mansonia spp. this behavior can severely harm Public Health and economics. In addition to the nuisance caused by bites, some species transmit pathogens to humans in certain geographic regions. To be effective, Mansonia spp. monitoring and control should be planned on the basis of the biology each species and its patterns of interaction with biotic and abiotic factors. Therefore, accurate field-collected specimens identification is essential, but it is hampered by historically observed patterns of intraspecific heteromorphism and interspecific isomorphism. Objective - To acquire unprecedented knowledge for planning actions to monitor and control population of Mansonia (Mansonia) spp. Methods - The following activities were carried out: a broad narrative bibliographical review; collections of immature and adult specimens in three Brazilian regions; morphological identification of samples at the species level; cytochrome c oxidase subunit I (COI) mitochondrial gene barcode region sequencing; and sequence analysis using five different methods, based on Kimura two-parameter genetic distances (Neighbor joining, ABGD, ASAP and RESL) and maximum likelihood phylogenetic inference (mPTP). Results - The bibliographic contents examined were assembled into a single manuscript that summarizes data on Mansonia spp. development, hosts, feeding patterns, epidemiological importance and adaptability to anthropogenic environments, among others. The analysis of immature samples from the Santo Antônio Hydroelectric Power Plant dam shows evidence of alternation in the attachment to host plant species and the unprecedented record of Mansonia humeralis larvae attached to Limnobium laevigatum roots. Three hundred and twenty-seven new COI barcode sequences were generated from Mansonia (Mansonia) spp. specimens. Morphology-based identification found eight species in the sample. The results for sequence segregation into operational taxonomic units (OTUs) were mostly congruent among five analysis methods. Sequence polymorphism patterns allowed the identification of eight species, corroborating the previous morphological identification. However, there is evidence that at least three of the morphology-based taxa may represent taxonomically unknown species complexes. The first records of COI barcodes for Mansonia fonsecai, Mansonia iguassuensis and Mansonia pseudotitillans were obtained. Conclusions - The referenced information gathered into the resulting manuscript from bibliographic review will contribute to future research. The publication of unprecedent data on molecular taxonomy and attachment to aquatic macrophytes will benefit the planning for Mansonia spp. monitoring and population control.

Integrative analysis in toxicological assessment of the insecticide Malathion in Allium cepa L. system / Análise integrativa na avaliação toxicológica do inseticida Malation no sistema Allium cepa L

Abstract For many centuries human populations have been suffering and trying to fight with disease-bearing mosquitoes. Emerging and reemerging diseases such as Dengue, Zika, and Chikungunya affect billions of people around the world and recently has been appealing to control with chemical pesticides. Malathion (MT) is one of the main pesticides used against mosquitoes, the vectors of these diseases. This study aimed to assess cytotoxicity and mutagenicity of the malathion for the bioindicator Allium cepa L. using a multivariate and integrative approach. Moreover, an appendix table was compiled with all available literature of insecticides assessed by the Allium cepa system to support our discussion. Exposures during 48h to 0.5 mg mL-1 and 1.0 mg mL-1 MT were compared to the negative control (distilled water) and positive control (MMS solution at 10 mg L-1). The presence of chromosomal aberrations, micronuclei frequency, and mitotic index abnormalities was evaluated. Anaphase bridges were the alterations with higher incidence and presented a significantly elevated rate in the concentration of 0.5 mg mL-1, including when compared to the positive control. The integrative discriminant analysis summarizes that MT in assessed concentrations presented effects like the positive control, corroborating its potential of toxicity to DNA. Therefore, it is concluded that MT in its pure composition and in realistic concentrations used, has genotoxic potential in the biological assessment of A. cepa cells. The multivariate integrative analysis was fundamental to show a whole response of all data, providing a global view of the effect of MT on DNA.

Resumo Por muitos séculos, as populações humanas sofrem e tentam combater os mosquitos transmissores de doenças. Doenças emergentes e reemergentes como Dengue, Zika e Chikungunya afetam bilhões de pessoas em todo o mundo e, recentemente, vem apelando ao controle com pesticidas químicos. O Malation (MT) é um dos principais pesticidas usados ​​contra mosquitos, vetores dessas doenças. O objetivo deste estudo foi avaliar a citotoxicidade e a mutagenicidade do MT para o bioindicador Allium cepa L. usando uma abordagem multivariada e integrativa. Além disso, uma tabela suplementar foi compilada com toda a literatura disponível de inseticidas avaliada pelo sistema Allium cepa para apoiar nossa discussão. Exposições ao MT durante 48h a 0,5 mg mL-1 e 1,0 mg mL-1 foram comparadas a um controle negativo (água destilada) e um controle positivo (10 mg L-1 de MMS). Foram avaliadas a presença de aberrações cromossômicas, frequência de micronúcleos e anormalidades no índice mitótico. As pontes anafásicas foram as alterações com maior incidência e apresentaram uma taxa significativamente elevada na concentração de 0,5 mg mL-1, inclusive quando comparadas ao controle positivo. A análise discriminante integrativa resume que o MT nas concentrações avaliadas apresentou efeitos semelhantes ao controle positivo, corroborando seu potencial de toxicidade para o DNA. Portanto, conclui-se que o MT, em sua composição pura e nas concentrações realistas utilizadas, possui potencial genotóxico na avaliação biológica de células de A. cepa. A análise integrativa multivariada foi fundamental para mostrar uma resposta completa de todos os dados, fornecendo uma visão global do efeito da MT no DNA.

Identification of locally isolated entomopathogenic Fusarium species from the soil of Changa Manga Forest, Pakistan and evaluation of their larvicidal efficacy against Aedes aegypti / Identificação de espécies de Fusarium entomopatogênicas localmente isoladas do solo da Floresta de Changa Manga, Paquistão e avaliação de sua eficácia larvicida contra Aedes aegypti

Abstract Dengue fever vectored by the mosquito Aedes aegypti is one of the most rapidly spreading insect-borne diseases. Current reliance of dengue vector control is mostly on chemical insecticides. Growing insecticide resistance in the primary mosquito vector, Aedes aegypti, limits the effectiveness of vector control through chemical insecticides. These chemical insecticides also have negative environmental impacts on animals, plants and human health. Myco-biocontrol agents are naturally occurring organisms and are found to be less damaging to the environment as compared to chemical insecticides. In the present study, entomopathogenic potential of local strains of fungi isolated from soil was assessed for the control of dengue vector. Local fungal isolates presents better alternative to introducing a foreign biocontrol strain, as they may be better adapted to environmental conditions of the area to survive and may have more entomopathogenic efficacy against target organism. Larvicidal efficacy of Fusarium equiseti and Fusarium proliferatum was evaluated against Aedes aegypti. Local strains of F. equiseti (MK371718) and F. proliferatum (MK371715) were isolated from the soil of Changa Manga Forest, Pakistan by using insect bait method. Larvicidal activity of two Fusarium spp. was tested against forth instar larvae of A. aegypti in the laboratory, using concentrations 105, 106, 107 and 108 conidia /ml. LC50 values for F. equiseti after 24h, 48h, 72h and 96h of exposure were recorded as 3.8x 108, 2.9x107, 2.0x107, and 7.1x106 conidia /ml respectively while LC50 values for F. proliferatum were recorded as 1.21x108, 9.6x107, 4.2x107, 2.6x107 conidia /ml respectively after 24h, 48h, 72h and 96h of exposure. The results indicate that among two fungal strains F. equiseti was found to be more effective in terms of its larvicidal activity than F. proliferatum against larvae of A. aegypti.

Resumo A dengue transmitida pelo mosquito Aedes aegypti é uma das doenças transmitidas por insetos de propagação mais rápida. A dependência atual do controle do vetor da dengue é principalmente de inseticidas químicos. O aumento da resistência a inseticidas no principal vetor do mosquito, Aedes aegypti, limita a eficácia do controle do vetor por meio de inseticidas químicos. Esses inseticidas químicos também têm impactos ambientais negativos sobre os animais, plantas e saúde humana. Os agentes de micobiocontrole são organismos que ocorrem naturalmente e são menos prejudiciais ao meio ambiente em comparação com os inseticidas químicos. No presente estudo, avaliou-se o potencial entomopatogênico de cepas locais de fungos isolados do solo para o controle do vetor da dengue. Isolados de fungos locais apresentam melhor alternativa para a introdução de uma cepa de biocontrole estrangeira, pois podem ser mais bem adaptados às condições ambientais da área para sobreviver e podem ter maior eficácia entomopatogênica contra o organismo-alvo. A eficácia larvicida de Fusarium equiseti e Fusarium proliferatum foi avaliada contra Aedes aegypti. Cepas locais de F. equiseti (MK371718) e F. proliferatum (MK371715) foram isoladas do solo de Changa Manga Forest, Paquistão, usando o método de isca para insetos. Atividade larvicida de dois Fusarium spp. foi testado contra larvas de quarto ínstar de A. aegypti em laboratório, nas concentrações 105, 106, 107 e 108 conídios / ml. Os valores de LC50 para F. equiseti após 24 h, 48 h, 72 h e 96 h de exposição foram registrados como 3,8x 108, 2,9x107, 2,0x107 e 7,1x106 conídios / ml, respectivamente, enquanto os valores de LC50 para F. proliferatum foram registrados como 1,21x108, 9,6 x107, 4,2x107, 2,6x107 conídios / ml, respectivamente, após 24 h, 48 h, 72 h e 96 h de exposição. Os resultados indicam que entre duas cepas de fungos F. equiseti se mostrou mais eficaz em termos de atividade larvicida do que F. proliferatum contra larvas de A. aegypti.

Evaluation of indigenous plants' extracts for mosquitocidal activity against different stages of Culex quinquefasciatus say (Diptera: Culicidae) / Avaliação de extratos de plantas indígenas quanto à atividade mosquitocida contra diferentes estágios de culex quinquefasciatus say (Diptera: Culicidae)

Abstract Being vector of West Nile Virus and falariasis the control of Culex quinquefasciatus is likely to be essential. Synthetic insecticide treatment is looking most effective for vectors mosquito control. However, these products are toxic to the environment and non-target organisms. Consequently, ecofriendly control of vectors mosquito is needed. In this regard botanical insecticide is looking more fruitful. Therefore, the present research aimed to investigate the effectiveness of methanolic extract and various fractions, including, n-hexane, ethyl-acetate, chloroform, and aqueous fraction, obtained from methanolic extract of Ailanthus altissima, Artemisia scoparia, and Justicia adhatoda using separating funnel against larval, pupal, and adult stages of Culex quinquefasciatus. The larvae and pupae of Culex quinquefasciatus were exposed to various concentrations (31.25-1000 ppm) of methanolic extract and its fractions for 24 hours of exposure period. For knock-down bioassay (filter paper impregnation bioassay) different concentration of the methanolic extract and its various fractions (i.e. 0.0625, 0.125, 0.25, 0.5 and 1mg/mL) were applied for 1 hour exposure period. The results were statistically analysed using standard deviation, probit analysis, and linear regression. The R2 values of larvae, pupae, and adult range from 0.4 to 0.99. The values of LC50 (concentration causing 50% mortality) for late 3rd instar larvae after 24 hours exposure period range from 93-1856.7 ppm, while LC90 values range from 424 -7635.5ppm. The values of LC50for pupae range form 1326.7-6818.4ppm and and values of LC90 range from 3667.3-17427.9ppm, respectively. The KDT50 range from 0.30 to 2.8% and KDT90 values range from1.2 to 110.8%, respectively. In conclusion, Justicia adhatoda may be effective for controlling populations of vector mosquito.

Resumo Por ser o vetor do vírus do Nilo Ocidental e da falaríase, o controle de Culex quinquefasciatus Say é provavelmente essencial. O tratamento com inseticida sintético parece ser mais eficaz para o controle dos mosquitos vetores. No entanto, esses produtos são tóxicos para o meio ambiente e organismos não visados. Consequentemente, o controle ecológico dos mosquitos vetores é necessário. Nesse sentido, o inseticida botânico parece mais produtivo. Portanto, a presente pesquisa teve como objetivo investigar a eficácia do extrato metanólico e de várias frações, incluindo n-hexano, acetato de etila, clorofórmio e fração aquosa, obtidos do extrato metanólico de Ailanthus altissima (Mill.) Swingle, Artemisia scoparia Waldst. & Kit. e Justicia adhatoda L. usando funil de separação contra os estágios larval, pupal e adulto de C. quinquefasciatus. As larvas e pupas de C. quinquefasciatus foram expostas a várias concentrações (31,25-1000 ppm) de extrato metanólico, e suas frações por 24 horas de período de exposição. Para o bioensaio knock-down (bioensaio de impregnação de papel de filtro), diferentes concentrações do extrato metanólico e suas várias frações (ou seja, 0,0625, 0,125, 0,25, 0,5 e 1 mg / mL) foram aplicadas por um período de exposição de 1 hora. Os resultados foram analisados ​​estatisticamente usando desvio padrão, análise Probit e regressão linear. Os valores de R2 de larvas, pupas e adultos variaram de 0,4 a 0,99. Os valores de LC50 (concentração que causa 50% de mortalidade) para larvas de terceiro estádio tardio após 24 horas de período de exposição variaram de 93-1856,7 ppm, enquanto os valores de LC90 variaram de 424-7635,5ppm. Os valores de LC50 para pupas variaram de 1326,7-6818,4 ppm e os valores de LC90 variaram de 3667,3-17427,9 ppm, respectivamente. O KDT50 variou de 0,30 a 2,8% e os valores de KDT90 variaram de 1,2 a 110,8%, respectivamente. Por fim, a espécie J. adhatoda pôde ser eficaz para controlar populações de mosquitos vetores.

Prevalencia del virus de dengue y factores de riesgo en pacientes que asistieron a las unidades de salud del cantón esmeraldas en el 2019 / Prevalence of the dengue virus and risk factors in patients who attended the health units of the Esmeraldas canton in 2019

El dengue es una enfermedad infecciosa ocasionada por alguno de los cuatro serotipos del virus análogo, que se transmite a los humanos a través de la picadura de mosquitos infectados del género Aedes Objetivo: Identificar la prevalencia del virus de dengue y los factores de riesgo en los pacientes que asistieron a las unidades de salud del cantón Esmeraldas en el 2019. Materiales y Métodos: La investigación se enmarca dentro del diseño de investigación no experimental, de tipo retrospectivo, descriptivo, basado en la información de pacientes con diagnóstico de dengue positivo atendidos en las unidades de Salud del cantón Esmeraldas en el 2019.Resultados: En este estudio se encontró a 247 pacientes registrados con diagnóstico presuntivo de dengue, los cuales tomamos como población, se excluyeron a 4 muestras de pacientes, no procesadas, y a 121 muestras de pacientes con resultado negativo, quedándonos 121 muestras de pacientes con diagnóstico de dengue confirmadas, tomando a esta cantidad de pacientes como muestra para nuestro estudio, lo que representa el 49% como prevalencia de virus del dengue en pacientes que asistieron a las unidades de salud del cantón Esmeraldas durante el 2019.Conclusión: La prevalencia de dengue en pacientes que asistieron a las unidades de salud del cantón Esmeraldas es del 49%, la edad que más predomino fue la comprendida entre los 5 y 9 años, un número significativo de pacientes, provienen de la parroquia Simón Plata Torres, sectores con falta de infraestructura de servicios básicos, jardines y patios con malezas y vegetación, arbustos y árboles que rodean a las viviendas, aumentando las posibilidades de cría de mosquitos vectores de esta afección(AU)

Dengue is an infectious disease caused by one of the four serotypes of the analogous virus, which is transmitted to humans through the bite of infected mosquitoes of the genus Aedes Objective: To identify the prevalence of dengue virus and risk factors in the patients who attended the health units of the Esmeraldas canton in 2019. Materials and Methods: The research is part of the non-experimental, retrospective, descriptive research design, based on the information of patients with a positive dengue diagnosis. treated in the health units of the Esmeraldas canton in 2019. Results: In this study, 247 registered patients with a presumptive diagnosis of dengue were found, which we took as a population, 4 samples of patients, not processed, and 121 samples were excluded. of patients with a negative result, leaving us with 121 samples of patients with a confirmed diagnosis of dengue, taking to this number of patients as a sample for our study, which represents 49% as the prevalence of dengue virus in patients who attended the health units of the Esmeraldas canton during 2019. Conclusion: The prevalence of dengue in patients who attended the health units of the Esmeraldas canton is 49%, the most predominant age was between 5 and 9 years, a significant number of patients come from the Simón Plata Torres parish, sectors with a lack of basic services infrastructure, gardens and patios with weeds and vegetation, bushes and trees that surround the houses, increasing the chances of breeding mosquito vectors of this condition(AU)

Diversidad genética de aedes aegypti en el eje transfronterizo Central-Alto Paraná en Paraguay / Genetic diversity of Aedes aegypti in the central-upper Paraná Cross-Border axis in Paraguay

RESUMEN Objetivos: Conocer la diversidad genética de Aedes aegypti en el corredor vial transfronterizo Central-Alto Paraná de Paraguay, con registros de casos de dengue. Materiales y métodos: Se seleccionaron veinte hembras adultas de la eclosión de huevos de Ae. aegypti procedentes de casas geolocalizadas en los departamentos de Alto Paraná, Caaguazú, Cordillera y Central, entre el 2018 y 2019. Se extrajo ADN del tejido de las hembras para amplificación aleatoria de sus patrones polimórficos mediante amplificación aleatoria del ADN polimórfico por PCR (RAPD-PCR), usando cebadores H3 y B03 a fin de conocer parámetros genéticos de diversidad poblacional. Las relaciones entre las poblaciones de mosquitos según la localidad fueron visualizadas mediante análisis no apareado de la media aritmética. Las áreas idóneas de distribución geográfica real y potencial de estas poblaciones de Ae. aegypti fueron analizadas mediante DIVA-GIS 7.3.0 y MAXENT. Resultados: Se identificaron 40 loci mediante perfiles RAPD-PCR, con diferenciación génica moderada (Gst = 0,12). El corredor transfronterizo presentó condiciones bioclimáticas para la presencia de poblaciones variantes de Ae. aegypti, siendo determinantes en la distribución la precipitación del trimestre más cálido y la temperatura media del trimestre más seco. Conclusiones: Se evidencia que existe diversidad genética moderada en las poblaciones de Ae. aegypti procedentes de zonas con registros de casos de dengue ubicadas en el corredor vial transfronterizo que une los departamentos Central y Alto Paraná de Paraguay. El estudio de variabilidad genética de Ae. aegypti es de gran utilidad para la vigilancia entomoepidemiológica y evaluación de posibles eventos de resistencia al control químico.

ABSTRACT Objective: To determine the genetic diversity of Aedes aegypti in the Central-Alto Paraná cross-border road corridor of Paraguay, an area that has reports of dengue cases. Materials and methods: Twenty adult females were selected from hatching Ae. aegypti eggs from households geolocated in the departments of Alto Paraná, Caaguazú, Cordillera and Central, between 2018 and 2019. DNA was extracted from the tissue of females for amplifying their polymorphic patterns by random amplification of polymorphic DNA by PCR (RAPD-PCR), using primers H3 and B03 in order to identify genetic parameters of population diversity. The relationships between mosquito populations according to locality were observed by unpaired arithmetic mean analysis. We used DIVA-GIS 7.3.0 and MAXENT to analyze the suitable areas of actual and potential geographic distribution of these Ae. aegypti populations. Results: Forty loci were identified by RAPD-PCR profiling, with moderate gene differentiation (Gst = 0.12). The cross-border corridor presented bioclimatic conditions for the presence of variant populations of Ae. aegypti, with precipitation in the warmest quarter and mean temperature in the driest quarter being determinant in the distribution. Conclusions: There is evidence of moderate genetic diversity in Ae. aegypti populations from areas that have reported dengue cases in the cross-border road corridor linking the Central and Alto Paraná departments of Paraguay. The study of genetic variability of Ae. aegypti is very useful for entomo-epidemiological surveillance and evaluation of possible resistance to chemical control.

Resistência das populações de Aedes (Stegomyia) aegypti (Linnaeus, 1762) (Insecta, Diptera, Culicidae) aos inseticidas utilizados para o controle: estado da arte do conhecimento / Resistance of Aedes (Stegomyia) aegypti (Linnaeus, 1762) (Insecta, Diptera, Culicidae) populations to insecticides used for control: art state of knowledge

Introdução: cerca de quatro bilhões de pessoas residem em áreas com risco de dengue, uma arbovirose transmitida pelo mosquito Aedes (Stegomyia) aegypti (Linnaeus, 1762) (Insecta, Diptera, Culicidae). Na tentativa de combater esse vetor e reduzir a disseminação da dengue, o meio de controle vetorial frequentemente utilizado são os inseticidas. Entretanto, o uso indiscriminado destes no controle do mosquito está relacionado aos mecanismos de resistência desse vetor. Objetivo: mapear as evidências científicas relacionadas à resistência do mosquito A. aegypti aos inseticidas utilizados para o controle populacional. Metodologia: revisão de escopo, segundo metodologia Instituto Joana Briggs, em bases de dados indexadas: PubMed, Embase, CINAHL, Web of Science, SCOPUS e Biblioteca Virtual em Saúde. Através do mnemônico PCC (população, conceito e contexto), elaborou-se a estratégia de busca utilizando descritores do Decs e Mesh. Resultados: foram encontrados 1.631 estudos sobre a temática. Após critérios de elegibilidade e seleção, foram incluídos 30 estudos específicos sobre resistência do Aedes aegypti a inseticidas foram incluídos na revisão. A maior parte tratou de forma experimental e 28 (93,3%) estudos trabalharam o controle químico. Em relação à resistência a inseticidas, em 20 estudos (66,6%) constatou-se resistência metabólica e em 9 (30%) a resistência mediada pela alteração da variabilidade genética. Os estudos que observaram mutação não deixam claro se a mutação gênica é especificamente devido à ação mutagênica aos inseticidas. Conclusões:o A. aegypti desenvolve adaptações que lhe conferem resistência aos inseticidas, sendo que esses mecanismos de resistência estão relacionados à variabilidade genética e a adaptações metabólicas, que são transmitidas a seus descendentes ao longo das gerações. Assim, torna-se necessário um avanço nos estudos visando não apenas identificar e explicar os mecanismos de resistência, mas encontrar meios alternativos de manejo que possam controlar o inseto sem ocasionar resistência aos mesmos.

Introduction: about four billion people live in areas at risk of dengue, an arbovirus transmitted by the Aedes (Stegomyia) aegypti (Linnaeus, 1762) (Insecta, Diptera, Culicidae). To combat this vector and reduce the spread of dengue, the means of vector control often used are insecticides. However, their indiscriminate use in mosquito control is related to the resistance mechanisms of this vector. Objective: to map the scientific evidence related to the resistance of the Aedes aegypti mosquito to the insecticides used to control dengue. Methodology: scope review, according to the Joana Briggs Institute methodology, in indexed databases: PubMed, Embase, CINAHL, Web of Science, SCOPUS and Virtual Health Library. Using the mnemonic PCC (population, concept and context), a search strategy was developed using Decs and Mesh descriptors. Results: 1,631 studies on the subject were found. After eligibility and selection criteria, 30 specific studies on Aedes aegypti resistance to insecticide were included in the review . Most treated experimentally and 28 (93.3%) studies worked on chemical control. Regarding the resistance to insecticide, in 20 studies (66.6%) there was found metabolic resistance and in 9 (30%) resistance mediated by modification on the genetic variability. Studies that have looked at mutation do not make it clear whether the gene mutation is specifically due to mutagenic action of insecticides. Conclusions: Aedes aegypti develops adaptations that gives them resistance to insecticides, and these resistance mechanisms are related to genetic variability and to metabolic adaptations, which are transmitted to its descendants over generations. Thus, it is necessary to perform advance in studies aiming not only to identify and explain the resistance mechanisms, but to find alternative means of management that can control the insect without causing resistance to them.

Ações educativas de enfrentamento ao Aedes Aegypti: revisão integrativa / Education-based Aedes Aegypti control actions: an integrative review

Resumo Objetivou sintetizar os estudos, publicados na literatura cientifica, que abordem estratégias de enfrentamento às arboviroses mediante ações educativas. Os dados foram coletados nas bases de dados: LILACS, BDENF e MEDLINE utilizando os descritores "Educação em Saúde" e "Aedes" empregando o operador booleano "AND". Foram encontrados 242 estudos, dos quais após aplicação dos critérios de inclusão e exclusão, 14 foram incluídos na revisão. Os dados foram analisados utilizando a abordagem qualitativa. Foram identificadas quatro categorias: ações de enfrentamento vetorial mediante capacitação da comunidade; mobilização social em torno do combate às arboviroses; combate vetorial a partir de ações educativas associadas ao uso de controle biológico; ações integradas de enfrentamento às arboviroses. Infere-se que a educação em saúde é um elemento indispensável para o enfrentamento às arboviroses que deverá ser implementada de forma conjunta e articuladas às demais estratégia de combate vetorial.

Abstract The aim of this study was to provide a synthesis of published studies investigating education-based arbovirus control strategies. The data were collected from the LILACS, BDENF and MEDLINE databases using the descriptors "Health Education" and "Aedes", together with the Boolean operator "AND". The searches retrieved 242 studies, 14 of which were included in the review after applying the inclusion and exclusion criteria. The data were analyzed using a qualitative approach, resulting in the identification of four categories: vector control actions based on community capacity building; social mobilization for arbovirus control; education-based vector control combined with biological control; and integrated arbovirus control actions. The findings show that health education is an essential element of arbovirus control and should be implemented in conjunction with other vector control strategies.

Aula invertida en el desarrollo de competencias para el control domicilario de mosquitos de importancia para la salud pública / Flipped classroom in the development of skills for home control of mosquitoes of importance to public health

El método de enseñanza-aprendizaje de aula invertida propicia actividades participativas, de esfuerzo y colaboración antes, durante y fuera del salón de clases. Por tal razón, que se propuso la aplicación del aula invertida en el desarrollo de competencias para el control domicilario de mosquitos de importancia para la salud pública en la Universidad Nacional Autónoma de Chota, Camarja, Perú. El estudio fue experimental con una muestra de 72 estudiantes. Para la recolección de datos se aplicó la estrategia didáctica del Modelo Flipped Classroom en dos tiempos (pre y post test). Se usó el software SPSS para medianas y prueba de Wilcoxon considerando un alpha del 5%. Como resultado, en el post-test sobre los factores de riesgo identificados en el domicilio se evidenciaron cambios significativos, donde 72,22% identificaron los recipientes de almacenamiento de agua expuestos, 51,39% Frascos/botellas/envases con agua estancada, 45,83% piletas sin liempieza, 29,17% Llantas/desechos al aire libre con agua estancada, 26,39% Floreros con agua vieja, 20,83% analetas/grietas con agua estancada, 12,50% otros y 8,33% no identifico ningún factor, la comparación de la puntuación promedio en competencias para el control domicilario de mosquitos, antes y después de la aplicación del aula invertida en la Prueba de Wilcoxon mostró una z de -4,81 en la dimesión de identificar, -4,860 proponer y -4862 actuar, todos con p 0,000% (diferencia altamente significativa). El método de aula invertida a través de métodos prácticos interactivos contribuye de manera significativa al desarrollo de competencias para el control domicilario de mosquitos de importancia de salud pública(AU)

The flipped classroom teaching-learning method encourages participatory, effortful, and collaborative activities before, during, and outside the classroom. For this reason, the application of the flipped classroom was proposed in the development of skills for the home control of mosquitoes of importance for public health at the National Autonomous University of Chota, Camarja, Peru. The study was experimental with a sample of 72 students. For data collection, the didactic strategy of the Flipped Classroom Model was applied in two stages (pre and post test). The SPSS software was used for medians and the Wilcoxon test considering an alpha of 5%. As a result, in the post-test on the risk factors identified at home, significant changes were evidenced, where 72.22% identified exposed water storage containers, 51.39% Jars/bottles/containers with stagnant water, 45 83% pools without cleaning, 29.17% tires/outdoor debris with stagnant water, 26.39% vases with old water, 20.83% holes/cracks with stagnant water, 12.50% others and 8.33 % did not identify any factor, the comparison of the average score in skills for home control of mosquitoes, before and after the application of the flipped classroom in the Wilcoxon Test showed a z of -4.81 in the dimension of identifying, - 4,860 propose and -4,862 act, all with p 0.000% (highly significant difference). The flipped classroom method through interactive practical methods contributes significantly to the development of skills for home control of mosquitoes of public health importance(AU)

Late effects of Beauveria bassiana on larval stages of Aedes aegypti Linneo , 1762 (Diptera: Culicidae) / Efeitos tardios de Beauveria bassiana nos estágios larvais de Aedes aegypti Linneo, 1762 (Diptera: Culicidae)

Aedes aegypti is a culicide that has gained relevance over the years due to its ability to transmit various viruses that cause diseases in humans that all the years cause high mortality rates in the world population. The main problem is that Ae. aegypti has managed to establish and maintain a close relationship with humans and their habitat, which is why the search for alternatives to control vector populations becomes imperative. The objective of the present work was to study the effects of two Beauveria bassiana strains on Aedes aegypti. Third instar larvae of Ae. aegypti in 250 mL plastic containers were inoculated with the GHA and NB3 strains at different concentrations (1.5 × 104 , 1.5× 105 , 1.5 × 106 and 1.5 × 107 conidia/mL). The NB3 strain presented highest mortality values with 63% in the highest concentration i.e., 1.5 × 107 , while for the GHA strain the highest mortality value was 30.7% at the same concentration. The results showed significant difference in mortality with respect to the strain and days post treatment (P = 0.0001), but not with respect to the conidial concentration (P = 0.634). The average mortality of larvae per day for the NB3 for different concentrations ranged from 20 to 25 larvae per day, while for the GHA daily mortality ranged from 5 to 12 larvae. In post-treatment mortality, the highest mortality was recorded in the third stage larvae for the NB3, while for GHA the highest percentage mortality was observed in individuals who managed to reach the adult state. The findings of the current research depicted the noteworthy role of B. bassiana for the management of an important vector of human disease.

O Aedes aegypti é um culicida que vem ganhando relevância ao longo dos anos devido à sua capacidade de transmitir diversos vírus causadores de doenças em humanos que ao longo dos anos ocasionam altas taxas de mortalidade na população mundial. O principal problema é que Ae. aegypti tem conseguido estabelecer e manter uma relação próxima com o homem e seu habitat, por isso a busca por alternativas para o controle das populações de vetores torna-se imperativa. O objetivo do presente trabalho foi estudar os efeitos de duas cepas de Beauveria bassiana sobre Ae. aegypti. Larvas de terceiro instar de Ae. aegypti em recipientes plásticos de 250 mL foram inoculados com as cepas GHA e NB3 em diferentes concentrações (1.5 × 104, 1.5 × 105, 1.5 × 106 e 1.5 × 107 conídios/mL). A cepa NB3 apresentou os maiores valores de mortalidade com 63% na concentração mais alta, ou seja, 1.5 × 107, enquanto para a cepa GHA o maior valor de mortalidade foi 30.7% na mesma concentração. Os resultados mostraram diferença significativa na mortalidade com relação à cepa e dias pós-tratamento (P = 0.0001), mas não com relação à concentração de conídios (P = 0.634). A mortalidade média de larvas por dia para o NB3 para diferentes concentrações variou de 20 a 25 larvas por dia, enquanto para o GHA a mortalidade diária variou de 5 a 12 larvas. Na mortalidade pós-tratamento, a maior mortalidade foi registrada nas larvas de terceiro estágio para o NB3, enquanto para o GHA o maior percentual de mortalidade foi observado em indivíduos que conseguiram atingir o estado adulto. Os resultados da pesquisa atual retratam o papel notável de B. bassiana no manejo de um importante vetor de doenças humanas.

Cutaneous leishmaniasis–Awareness, knowledge and practices among general population in rural and urban areas in Malakand region, Pakistan / Leishmaniose cutânea - conscientização, conhecimentos e práticas entre a população em geral nas áreas rurais e urbanas da região de Malakand, Paquistão

Malakand region is an endemic area for cutaneous leishmaniasis (CL). However, there are limited number of studies of this disease in Pakistan. Therefore, a study was conducted to understand the level of awareness attitude and practice among the residents of Makaland towards CL and the disease vectors. This study adopted a cross-sectional approach with a total of 400 respondents (n=93 rural and n= 307 urban). Overall, the population in Malakand region (61.2%) were well-informed in the role of sand fly in transmitting diseases, but most lack knowledge on the vector's behavior and almost a quarter (24.5%) were unable to provide knowledge on proper control measures. Alarmingly, the practice and attitudes of the general population was not satisfactory as close to half (49.8%) of the population did adopt any control method. This study calls for increase in awareness through health education campaign to reduce the risk of cutaneous leishmaniasis outbreaks in the future.

A região de Malakand é uma área endêmica para leishmaniose cutânea (CL). No entanto, há um número limitado de estudos sobre esta doença no Paquistão. Portanto, foi realizado um estudo para entender o nível de atitude e prática de conscientização entre os residentes de Makaland em relação aos CL e os vetores da doença. Este estudo adotou uma abordagem transversal com um total de 400 entrevistados (n = 93 rural e n = 307 urbano). No geral, a população da região de Malakand (61,2%) estava bem informada sobre o papel da mosca na transmissão de doenças, mas a maioria não possui conhecimento sobre o comportamento do vetor e quase um quarto (24,5%) foi incapaz de fornecer conhecimento sobre medidas de controle adequadas . De maneira alarmante, a prática e as atitudes da população em geral não foram satisfatórias, pois cerca da metade (49,8%) da população adotou algum método de controle. Este estudo apela ao aumento da conscientização por meio de campanhas de educação em saúde para reduzir o risco de surtos de leishmaniose cutânea no futuro.

Intervenciones genéticas de Aedes aegypti para el control de arbovirosis / Genetic interventions of Aedes aegypti for the control of arboviruses

La ineficacia de las estrategias actuales para el control químico de los mosquitos vectores plantea la necesidad de desarrollar enfoques novedosos, entre estos están las estrategias genéticas para reducir las poblaciones de mosquitos vectores o sustituirlos por aquellos que no son capaces de transmitir patógenos, esto se logra a través de herramientas moleculares que permiten la manipulación y transgénesis de genes. Las secuencias del genoma de los mosquitos y las bases de datos de marcadores de secuencias expresadas asociadas permiten investigaciones a gran escala para proporcionar nuevos conocimientos sobre las vías evolutivas, bioquímicas, genéticas, metabólicas y fisiológicas. Además, la genómica comparativa revela las bases de los mecanismos evolutivos con especial atención a las interacciones específicas entre vectores y patógenos. Se ha desarrollado tecnología de transgénesis para el mosquito de la fiebre amarilla y dengue, Aedes aegypti. Se ha logrado integración exitosa de ADN exógeno en la línea germinal de este mosquito con los elementos transponibles. La disponibilidad de múltiples elementos y genes marcadores proporciona un poderoso conjunto de herramientas para investigar las propiedades biológicas básicas de este insecto vector, así como los materiales para desarrollar nuevas estrategias de control genético de poblaciones de mosquitos basadas en la técnica del insecto estéril. Una de estas estrategias consiste en liberar a la población machos esterilizados por radiación; otro, de integrar un gen letal dominante bajo el control de un promotor específico en hembras inmaduras. El uso de esta técnica de modificación genética constituirá una herramienta importante para el manejo integrado de vectores(AU)

The ineffectiveness of current strategies for the chemical control of vector mosquitoes raises the need to develop novel approaches, among these are genetic strategies to reduce populations of vector mosquitoes or replace them with those that are not capable of transmitting pathogens, this is achieved through molecular tools that allow the manipulation and transgenesis of genes. Mosquito genome sequences and associated expressed sequence marker databases enable large-scale investigations to provide new insights into evolutionary, biochemical, genetic, metabolic, and physiological pathways. Furthermore, comparative genomics reveals the basis of evolutionary mechanisms with special attention to the specific interactions between vectors and pathogens. Transgenesis technology has been developed for the yellow fever and dengue mosquito, Aedes aegypti. Successful integration of exogenous DNA into the germ line of this mosquito with the transposable elements has been achieved. The availability of multiple elements and marker genes provides a powerful set of tools to investigate the basic biological properties of this insect vector, as well as the materials to develop new strategies for genetic control of mosquito populations based on the sterile insect technique. One of this strategy is to release radiation-sterilized males into the population; another, to integrate a dominant lethal gene under the control of a specific promoter in immature females. The use of this genetic modification technique will constitute an important tool for the integrated management of vectors(AU)

Arboalvo: estratificação territorial para definição de áreas de pronta resposta para vigilância e controle de arboviroses urbanas em tempo oportuno / Arboalvo: territorial stratification for definition of areas for prompt response by surveillance and timely control of urban arbovirus infections / Arboalvo: estratificación territorial para la definición de áreas de respuesta rápida para la vigilancia y control de arbovirosis urbanas en el momento oportuno

O objetivo deste trabalho foi apresentar a proposta metodológica denominada de "Pronta Resposta" modelada nas cidades de Belo Horizonte (Minas Gerais) e Natal (Rio Grande do Norte), Brasil. A metodologia visa identificar e delimitar áreas prioritárias para o direcionamento das ações de vigilância em tempo oportuno, buscando a redução da intensidade e velocidade da dispersão de epidemias em áreas urbanas endêmicas. Para tanto, a metodologia utiliza três variáveis, que representam as causas necessárias para a produção e reprodução da dengue: casos notificados (vírus), ovos de Aedes (vetor) e população (hospedeiro). Trata-se de um estudo ecológico que utilizou os dados dos três planos de informações agregados em escalas temporais e espaciais mais finas, de três a quatro semanas e grades de 400 a 600 metros respectivamente. As áreas de pronta resposta foram definidas por meio de análise estatística de varredura Scan, com definição de clusters espaciais simultâneos para os três planos por meio do programa SaTScan. Os resultados observados foram: na cidade de Natal, as áreas definidas como pronta resposta ocuparam em média 15,2% do território do município e concentraram 67,77% dos casos de dengue do período posterior ao utilizado na delimitação das áreas de pronta resposta, e em Belo Horizonte, os números observados foram de 64,16% dos casos em 23,23% do território. Esses resultados foram obtidos em duas cidades com realidades socioambientais e geográficas diferentes e com perfis epidemiológicos também distintos, apontando que a metodologia pode ser aplicada em diferentes realidades urbanas, criando a possibilidade de os programas de controle atuarem em porções reduzidas do território e impactar num alto percentual de casos em tempo oportuno.

The study aimed to present the methodological proposal entitled "Prompt Response", modelled in the cities of Belo Horizonte (Minas Gerais State) and Natal (Rio Grande do Norte State), Brazil. The proposal aims to identify and demarcate priority areas for timely targeting of surveillance activities, aiming to reduce the intensity and velocity in the spread of epidemics in endemic urban areas. The methodology uses three variables that represent the necessary causes for the production and reproduction of dengue: notified cases (virus), Aedes eggs (vector), and population (host). This was an ecological study that used data from three information planes aggregated in finer temporal and spatial scales of 3 to 4 weeks and 400 to 600-meter grids, respectively. The prompt response areas were defined by Scan statistical analysis with definition of simultaneous spatial clusters for the three planes via the SaTScan program. In Natal, the areas defined as prompt response occupied, on average, 15.2% of the city's territory and concentrated 67.77% of the dengue cases in the period following demarcation of the prompt response areas. In Belo Horizonte, the observed proportions were 64.16% of cases in 23.23% of the territory. These results were obtained in two cities with different socioenvironmental and geographic realities and distinct epidemiological profiles, indicating that the methodology can be applied to different urban realities, allowing control programs to concentrate on reduced portions of the territory and impacting a high percentage of cases in timely fashion.

El objetivo del trabajo fue presentar la propuesta metodológica, denominada de "Resposta Rápida", modelada en las ciudades de Belo Horizonte (Minas Gerais) y Natal (Rio Grande do Norte), Brasil. Esta última tiene como meta identificar y delimitar áreas prioritarias para la ejecución de acciones de vigilancia en el momento oportuno, buscando la reducción de la intensidad y velocidad de la dispersión de epidemias en áreas urbanas endémicas. Para tal fin, la metodología utiliza tres variables, que representan las causas necesarias para la producción y reproducción del dengue: casos notificados (virus), huevos de Aedes (vector) y población (huésped). Se trata de un estudio ecológico que utilizó los datos de los tres planos de información agregados en escalas temporales y espaciales más finas, de 3 a 4 semanas y tablas de 400 a 600 metros respectivamente. Las áreas de respuesta rápida se definieron a través del análisis estadístico de exploración Scan, con definición de clústeres espaciales simultáneos para los tres planos mediante el programa SaTScan. Los resultados observados fueron: en la ciudad de Natal, las áreas definidas como de respuesta rápida ocuparon de media un 15,2% del territorio del municipio y concentraron un 67,77% de los casos de dengue del período posterior al utilizado en la delimitación de las áreas de respuesta rápida y, en Belo Horizonte, los números observados fueron un 64,16% de los casos en un 23,23% del territorio. Estos resultados se obtuvieron en dos ciudades con realidades socioambientales y geográficas diferentes y con perfiles epidemiológicos también distintos, apuntando que la metodología se puede aplicar en diferentes realidades urbanas. Dando la posibilidad de que los programas de control actúen en secciones reducidas del territorio e impactar en un alto porcentaje de casos en el momento oportuno.

Diversidad, riqueza de especies y abundancia relativa de mosquitos adultos (Diptera: Culicidae) en localidades del municipio Gran Sabana, edo. Bolívar / Diversity, species richness and relative abundance of adult mosquitoes (Diptera: Culicidae) in localities of the Gran Sabana municipality, Bolívar state

Este estudio forma parte de la primera etapa de una serie de estudios sobre la ecología, biodiversidad y biogeografía de los mosquitos de la familia Culicidae de Venezuela, principalmente en Bolívar y Delta Amacuro. El objetivo del estudio fue caracterizar la composición de especies, la abundancia y la biodiversidad de mosquitos (Diptera; Culicidae) en el municipio Gran Sabana del estado Bolívar. Las capturas de mosquitos adultos se realizaron con aspiradores bucales mediante capturas por atracción al cebo humano y con trampas de luz negra. Se determinó la riqueza de especies, su abundancia relativa e índices ecológicos de diversidad Shannon-Wiener (H'), equidad de Simpson (E) y dominancia-D, del área general de estudio y sitios o comunidades de muestreo. Los resultados del estudio, generaron el registro de 7.860 ejemplares adultos de Culicidae identificados a nivel de especie, pertenecientes a 69 especies y 17 géneros, de ellos 7.797 (99,19%) fueron hembras adultas capturadas picando o con trampas de luz y 63 (0,81%) fueron machos capturados con trampas de luz. El 16,6% (1.297) de las hembras fue atraído por trampas de luz y el 83,4% (6.500) por cebo humano. Entre las especies más abundantes del estudio están: Culex quinquefasciatus (26,67 %), Anopheles peryassui (12,32 %), Aedes aegypti (11,87 %), Coquilletidia juxtamansonia (8,28 %), Anopheles braziliensis (6,97 %) Anopheles triannulatus s.l. (6,39 %), Coquilletidia nigricans (2,88 %), Coquilletidia venezuelensis (2,51 %) y Anopheles albitarsis s.l. (2,44 %), las cuales en conjunto representan 80,33 % del total de adultos capturado. Se discuten algunos aspectos sobre su ecología, importancia médica y el riesgo epidemiológico que representan para el país algunas especies reportadas. La diversidad de Shannon-Wiener (H') del área general de estudio fue de 2,665, la equidad de Simpson (E) fue igual a 0,8787222 y la dominancia (D) fue de 0,1213. El mayor índice de diversidad (Shannon-Wiener) ocurrió en Chiririka (2,675), seguido de Betania (2,409), Santa Elena Capital (2,354), Manak-Krü (2,203) y Waramasén (2,181). En cuanto a la riqueza de especies por localidad, las comunidades con mayor riqueza de especies fueron: Santa Elena (Capital), Waramasén y Chiririka con 50, 35 y 30 especies respectivamente, seguidas por San Antonio del Morichal con 23 y Kinok-Pon Parú, con 22 especies(AU)

This is the first part of a series of studies related to biodiversity, ecological and biogeographic aspects of the mosquitoes of Culicidae family in Venezuela. The objective of this study was the ecological characterization of species composition, diversity and abundance of Culicidae mosquitoes (Diptera: Culicidae) in the Gran Sabana Municipality, Bolívar State. Mosquitoes were captured in adult collections, with aspirators on human landing catches and with black light traps. A total of 7.860 adult's mosquitoes were collected and 69 species and 17 genera of Culicidae were identified. A total of 7.797 mosquitoes (99.19%) were females and 63 (0,81%) were males. Some 16,6 % (1.297) of females mosquitoes were attracted to the light traps and 83,4% (6.500) to human bait. The most abundant species in adult stage were: Culex quinquefasciatus (26,67%), Anopheles peryassui (12,32 %), Aedes aegypti (11,87 %), Coquilletidia juxtamansonia (8,28%), Anopheles braziliensis (6,97%), Anopheles triannulatus s.l. (6,39%), Coquilletidia nigricans (2,88%), Coquilletidia venezuelensis (2,51%) and Anopheles albitarsis s.l. (2,44%). Their medical importance of some mosquito species is commented, and some ecological and epidemiological aspects of the mosquito reported are discussed. The diversity index (Shannon-Wiener) of the estudy area was 2,665, the Simpson equity index was 0, 8787222 and the index of dominance was 0, 1213. The higher diversity index was registered in Chiririka (2,675), Betania (2,409), Santa Elena Capital (2,354), Manak-Krü (2,203) and Waramasén (2,181). The higher species richness was registered in Santa Elena (50 species), Waramasén (35 species), Chiririka (30 species), San Antonio del Morichal (23 species) and Kinok-Pon Parú (22 species) (AU)

Strain of Bacillus thuringiensis from Restinga, toxic to Aedes (Stegomyia) aegypti (Linnaeus) (Diptera, Culicidae) / Estirpe de Bacillus thuringiensis da restinga, tóxico ao Aedes (Stegomyia) aegypti (Linnaeus) (Diptera, Culicidae)

Abstract Bacillus thuringiensis is the most commonly used entomopathogen in the control of Aedes aegypti, which is a vector for different etiological agents that cause serious infections in humans. Several studies aim to isolate strains of this bacterium from different environments, with the perspective of selecting isolates with larvicidal activity for mosquitoes. Aiming at the insecticidal action of B. thuringiensis, the present study aimed to prospect B. thuringiensis of restinga and mangrove soils from the state of Maranhão, Brazil, with toxic potential for use in the biological control of Ae. aegypti. Bioassays were performed to determine the entomopathogenic activity of the bacilli against Ae. aegypti and lethal concentrations (LC50 and CL90) were estimated after the tests. Polymerase Chain Reaction and SDS-PAGE techniques were performed to verify the gene and protein content of the isolates, respectively. The soil of the mangrove and restinga ecosystems showed potential for obtaining B. thuringiensis. This isolate, in addition to having proteins with molecular mass similar to the toxins Cry and Cyt, also presented several diptera-specific genes cry and cyt, demonstrating that it has high potential to be used in the biological control of Ae. aegypti.

Resumo Bacillus thuringiensis é o entomopatógeno mais utilizado no controle do Aedes aegypti, vetor de diferentes agentes etiológicos que causam infecções graves em humanos. Diversos estudos têm como objetivo isolar cepas dessa bactéria de diferentes ambientes, com a perspectiva de selecionar isolados com atividade larvicida para mosquitos. Visando a ação inseticida de B. thuringiensis, o presente estudo teve como objetivo prospectar B. thuringiensis de solos de restinga e mangue do estado do Maranhão, Brasil, com potencial tóxico para uso no controle biológico de Ae. aegypti. Bioensaios foram realizados para determinar a atividade entomopatogênica do bacilo contra Ae. aegypti e as concentrações letais (CL50 e CL90) foram estimadas após os testes. As técnicas de Reação em Cadeia da Polimerase e SDS-PAGE foram realizadas para verificar o conteúdo de genes e proteínas dos isolados, respectivamente. Os solos dos ecossistemas de mangue e restinga apresentaram potencial para obtenção de B. thuringiensis. O isolado BtMA-750, obtido a partir da amostra de solo da restinga, foi interessantemente distinguido por sua alta toxicidade para Ae. aegypti. Este isolado, além de apresentar proteínas com massa molecular semelhante às toxinas Cry e Cyt, apresentou também diversos genes díptero-específicos cry e cyt, demonstrando que tem alto potencial para ser usado no controle biológico de Ae. aegypti.

Detección de Aedes (Stegomyia) albopictus (Skuse) en ovitrampas en Mérida, México / Detection of Aedes (Stegomyia) albopictus (Skuse) in ovitraps of Mérida city, México

Resumen | Introducción. El programa de enfermedades transmitidas por vectores en México tiene una red establecida de ovitrampas para la vigilancia entomológica de Aedes spp. Los servicios de salud del estado de Yucatán, en respuesta a reportes de Aedes albopictus en la periferia de Mérida, capital del estado, incrementaron la especificidad de dicha vigilancia. Objetivo. Describir la presencia y distribución de Ae. albopictus en Mérida y su abundancia relativa comparada con Aedes aegypti, en ovitrampas del programa de control de vectores. Materiales y métodos. Durante octubre de 2019, se seleccionaron al azar 91 ovitrampas en 31 barrios de Mérida. Los mosquitos adultos se obtuvieron del insectario de la Unidad Colaborativa para Bioensayos Entomológicos de la Universidad Autónoma de Yucatán a partir de huevos recolectados en campo. Se determinó la abundancia relativa de individuos adultos de cada especie identificada y por barrios evaluados. Resultados. En el 32 % de los barrios muestreados, se detectó Ae. albopictus y, en todos ellos, Ae. aegypti. Se recolectaron 28 adultos de Ae. albopictus (10 hembras y 18 machos) en las ovitrampas. No se observó correlación entre la abundancia de adultos ni de hembras Ae. aegypti y Ae. albopictus por barrio (p>0,05). Conclusiones. Los resultados confirmaron que Ae. albopictus estaba coexistiendo con Ae.aegypti en Mérida en el momento del estudio. La baja abundancia relativa sugiere que Ae.albopictus se encontraba en la fase inicial de invasión.

Abstract | Introduction:The vector-borne diseases program in México has an established network of ovitraps for entomological surveillance of Aedes spp. In response to reports of Aedes albopictus in the periphery of Mérida, the state capital of Yucatán, the Ministry of Health increased the specificity of this surveillance. Objective: To describe the presence and distribution of Ae. albopictus in Mérida and its relative abundance compared to Aedesaegypti in ovitraps of the vector control program. Materials and methods: During October, 2019, 91 ovitraps were randomly selected from 31 neighborhoods of Mérida. Mosquitoes were reared at the insectary of the Collaborative Unit for Entomological Bioassays of the Autonomous University of Yucatán from eggs collected in the field. Relative abundance was determined for adult individuals of each identified species and neighborhood. Results: 32 % of the neighborhoods were positive for Ae. albopictus and 100 % for Ae. aegypti. A total of 28 adults of Ae. albopictus (10 females and 18 males) were obtained from ovitraps. No correlation was observed between the abundance of Ae. aegypti and Ae. albopictus for both adults and females (p>0.05) at the neighborhood level. Conclusions: The results confirm that Ae. albopictus coexisted with Ae. aegypti in Mérida at the time of the study. The low relative abundance suggests that Ae. albopictus was in the initial phase of invasion.

Incidência de dengue e indicadores socioeconômicos e entomológicos em Santos, São Paulo, 2012-2016 / Incidence of dengue and socioeconomic and entomological indicators in Santos, São Paulo State, 2012-2016 / Incidência de dengue e indicadores socioeconómicos y entomológicos en Santos, Estado De São Paulo, 2012-2016

Objetivo: descrever incidência de dengue em Santos/SP e relacionar coeficiente de incidência (CI) de dengue com indicadores socioeconômicos e entomológicos de 2012-2016. Método: estudo epidemiológico, descritivo, ecológico dos casos confirmados de dengue, residentes em Santos, de 2012-2016, do Sistema de Informação de Agravos de Notificação-Online; foram obtidos seis indicadores socioeconômicos da base de setores censitários do Instituto Brasileiro de Geografia e Estatística-2010; o sétimo do Índice Paulista de Vulnerabilidade Social-2010 e os indicadores entomológicos da Secretaria de Saúde; foi aplicada Correlação bivariada de Spearman (SPSS-Statistics®). Aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa-CAAE nº79776017.1.0000.5479. Resultados: de 2012-2016 ocorreram 16.451 casos, com CI de 117,4 (2012) a 2.122,8 (2013) casos/100.000 habitantes, maior no sexo feminino e de 15-29 anos; os fatores socioeconômicos foram mais significativos entre 2015-2016; o Índice de Densidade de fêmeas Aedes aegypti apresentou maior correlação positiva. Conclusão: descreveu-se perfil epidemiológico/entomológico da dengue, apoiando gestores nas ações locais de controle.(AU)

Objectives: describe incidence of dengue in Santos/SP and relate dengue incidence coefficient (IC) with socioeconomic and entomological indicators from 2012-2016. Methods: epidemiological, descriptive, ecological study of confirmed cases of dengue, resident in Santos, from 2012-2016, of the Online-Notifiable Diseases Information System; six socioeconomic indicators were obtained from census sectors base of Brazilian Institute of Geography and Statistics-2010; the seventh from the São Paulo Index of Social Vulnerability-2010 and the entomological indicators from the Health Department; Spearman's Bivariate Correlation (SPSS-Statistics®) was applied. Approved by the Research Ethics Committee-CAAE nº79776017.1.0000.5479. Results: from 2012-2016 there were 16.451 cases, with IC from 117,4 (2012) to 2.122,8 (2013) cases/100.000 inhabitants, higher in females and between 15-29 years old; socioeconomic factors were more significant between 2015-2016; the Density Index of Aedes aegypti females showed a greater positive correlation. Conclusion: epidemiological/entomological profile of dengue was described, supporting managers in local control actions.(AU)

Objetivos: describir incidencia del dengue en Santos/SP y relacionar coeficiente de incidencia (CI) del dengue con indicadores socioeconómicos y entomológicos para 2012-2016. Métodos: estudio epidemiológico, descriptivo, ecológico de casos confirmados de dengue, residentes en Santos, desde 2012-2016, del Sistema de Información de Enfermedades de Notificación-Online; obtuvieron-se seis indicadores socioeconómicos desde base de sectores censales del Instituto Brasileño de Geografía y Estadística-2010, el séptimo del Índice de Vulnerabilidad Social de São Paulo-2010 y los indicadores entomológicos del Departamento de Salud. Aplicó-se Correlación Bivariada de Spearman (SPSS-Statistics®). Aprobado por el Comité de Ética en Investigación-CAAE nº79776017.1.0000.5479. Resultados: desde 2012-2016 hubo 16.451 casos, con CI de 117,4 (2012) a 2.122,8 (2013) casos/100.000 habitantes, mayor en mujeres y de 15-29 años; los factores socioeconómicos fueron más significativos entre 2015-2016; el Índice de Densidad de hembras Aedes aegypti mostró mayor correlación positiva. Conclusión: describió-se perfil epidemiológico/entomológico del dengue, apoyando a los gerentes en acciones de control local.(AU)

Isolates of Bacillus thuringiensis from Maranhão biomes with potential insecticidal action against Aedes aegypti larvae (Diptera, Culicidae) / Isolados de Bacillus thuringiensis de biomas maranhenses com potencial ação inseticida contra larvas de Aedes aegypti (Diptera, Culicidae)

Abstract Entomopathogenic agents are viable and effective options due to their selective action against insects but benign effects on humans and the environment. The most promising entomopathogens include subspecies of Bacillus thuringiensis (Bt), which are widely used for the biological control of insects, including mosquito vectors of human pathogens. The efficacy of B. thuringiensis toxicity has led to the search for new potentially toxic isolates in different regions of the world. Therefore, soil samples from the Amazon, Cerrado and Caatinga biomes of the state of Maranhão were evaluated for their potential larvicidal action against Aedes aegypti. The isolates with high toxicity to mosquito larvae, as detected by bioassays, were subjected to histological evaluation under a light microscope to identify the genes potentially responsible for the toxicity. Additionally, the toxic effects of these isolates on the intestinal epithelium were assessed. In the new B. thuringiensis isolates toxic to A. aegypti larvae, cry and cyt genes were amplified at different frequencies, with cry4, cyt1, cry32, cry10 and cry11 being the most frequent (33-55%) among those investigated. These genes encode specific proteins toxic to dipterans and may explain the severe morphological changes in the intestine of A. aegypti larvae caused by the toxins of the isolates.

Resumo Os agentes entomopatógenos são alternativas viáveis e eficazes, devido à sua ação seletiva para insetos sendo inofensivos ao homem e ao meio ambiente. Dentre os entomopatógenos mais promissores, destacam-se as subespécies de Bacillus thuringiensis (Bt) amplamente utilizadas no controle biológico de insetos incluindo espécies de mosquitos vetores de agentes patogênicos ao homem. A eficiência da toxicidade de Bt incentiva a prospecção de novos isolados em diversas regiões do mundo. Desta forma, em busca de novos isolados de B. thuringiensis potencialmente tóxicos, amostras de solo provenientes dos biomas Amazônia, Cerrado e Caatinga do estado do Maranhão foram avaliadas em relação ao seu potencial larvicida para Aedes aegypti. Os isolados que provocaram elevada toxicidade para larvas do mosquito, detectada por bioensaios, foram avaliados em relação aos potenciais genes responsáveis pela atividade tóxica, além da avaliação de efeitos tóxicos no epitélio intestinal através de análises histológicas em microscopia de luz. Os novos isolados de Bt tóxicos para larva de A. aegypti amplificaram frequências diferentes de genes cry e cyt sendo os mais frequentes (55-33%) os cry4, cyt1, cry32, cry10 e cry11 dentre os investigados. Esses genes codificam para proteínas tóxicas específicas para ordem Diptera, e podem explicar as severas alterações morfológicas provocadas pelas toxinas dos isolados observadas no intestino das larvas de A. aegypti.